转肌细胞特异表达MSTN基因RNA干涉序列的小鼠成纤维细胞株的筛选

文献类型: 中文期刊

第一作者: 吴治昊

作者: 吴治昊;薛超;安星兰;王春生;苗向阳

作者机构:

关键词: 小鼠;MSTN基因;RNA干涉;成纤维细胞;转基因

期刊名称: 黑龙江畜牧兽医

ISSN: 1004-7034

年卷期: 2012 年 09 期

页码: 1-4+189

收录情况: 北大核心

摘要: 为了筛选肌细胞特异表达MSTN基因RNA干涉序列的小鼠成纤维细胞株,研究利用人工合成的小鼠肌肉启动子SP,连接前期工作中获得带有GFP基因的小鼠MSTN基因RNA干涉载体pR-NAT-M1,构建真核表达载体pRNAT-SP-M1,将pRNAT-SP-M1线性化后转染小鼠成纤维细胞并通过300μg/mL G418筛选获得转基因阳性细胞。结果表明:获得的转基因阳性细胞呈现正常的小鼠成纤维细胞的梭形,且在荧光显微镜下呈现出表达绿色荧光蛋白的绿色;转基因阳性细胞的生长曲线呈"S"形;转基因阳性细胞经冷冻复苏后,仍具有正常的细胞形态和增殖特性;PCR鉴定结果显示转基因阳性细胞基因组DNA中整合有pRNAT-SP-M1序列。说明成功获得了转肌细胞特异表达的MSTN基因RNA干涉序列小鼠成纤维细胞株。

分类号: S865.13

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