MDCC-MSB1细胞酵母双杂交cDNA表达文库的构建与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 崔鹏鹏

作者： 崔鹏鹏;高宏雷;李凯;高立;高玉龙;祁小乐;王笑梅

作者机构：

关键词： MDCC-MSB1细胞;cDNA文库;鸡传染性贫血;酵母双杂交

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2013 年 40 卷 005 期

页码： 22-25

收录情况： 北大核心

摘要： 提取生长状态良好的MDCC-MSB1细胞的mRNA,以5′端标记有生物素的Oligo dT primer为引物反转录,合成双链后连接Adapter.分级纯化后,通过BP重组反应构建入门文库,滴度为1*105 CFU/mL,文库总容量为1.1*106 CFU,平均插入片段长度为1190bp,阳性重组率为100%.入门文库扩增后提取质粒,通过LR重组反应转化为表达文库,平均滴度为1*105 CFU/mL,文库总容量为1.2*106 CFU,平均插入片段长度为1087bp,重组率为100%.构建的表达文库具有较高的质量,为研究鸡传染性贫血病毒的受体及其细胞嗜性奠定了基础.

分类号： S858.31

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