PTH 1-34对鹿茸间充质干细胞成骨机制的转录组学分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 邢宝瑞

作者： 邢宝瑞;赵海平;李光玉;马泽芳;孙红梅;胡肖;谭展清;刘振

作者机构：

关键词： 鹿茸;甲状旁腺素1-34;间充质干细胞;成骨诱导;转录组学

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2024 年 39 卷 0S1 期

页码： 344-352

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： PTH 1-34对鹿茸间充质干细胞具有促成骨作用，旨在利用高通量无参转录组测序方法探索PTH 1-34促进鹿茸间充质干细胞成骨的可能机制。选用第3代鹿茸间充质干细胞，按试验要求随机分为3组(对照组、诱导组、PTH 1-34干预组),每组3个重复，诱导组添加成骨诱导液诱导鹿茸间充质干细胞成骨分化，PTH 1-34干预组在诱导组基础上添加10 nmol/L PTH 1-34。培养21 d,采用碱性磷酸酶和茜素红染色的方法对标志物和钙结节进行鉴定，鉴定完毕后，使用TRIzol法进行总RNA提取并采用第二代测序技术(Next-Generation Sequencing),基于Illumina测序平台，对这些文库进行双末端测序。添加浓度为10 mmol/L PTH 1-34进行成骨诱导，可明显增加鹿茸间充质干细胞碱性磷酸酶活性和钙结节的产生量。因与NCBI所发布的鹿科动物基因序列比对效率低于50%,选择了无参转录组测序。通过对差异基因富集分析，共筛选出5 737个差异表达基因，其中1 877个上调，3 860个下调；GO富集分析显示，在生物过程作用下，差异基因的种类主要包括细胞运动、细胞增殖、细胞迁移、骨发育、血管生成和形态发生相关；通过筛选，找到了8个与成骨相关基因：RUNX2、BGN、ALPL、SPARC、OPN、CPNE1、STRN4、VAPB;2个与细胞自噬相关基因：WiPi2、ATG14;4个与血管生成相关基因：UNC5B、SHC1、FLNA、TNFSF15,使用qRT-PCR方法进行验证，结果与测序结果一致；转录因子预测相关性较高的家族为zf-C2H2,并筛选到了成骨转录因子SP7。PTH 1-34可通过上调RUNX2、SP7、BGN、ALPL、SPARC、OPN、CPNE1、STRN4、VAPB的mRNA表达来促进鹿茸间充质干细胞的成骨分化；可能通过抑制血管生成和细胞自噬来调节鹿茸的骨化过程。

分类号： S825

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