猪带绦虫未知基因SLCIO在毕赤酵母中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王颖

作者： 王颖;骆学农;郑亚东;马全英;丁军涛;景志忠;才学鹏

作者机构：

关键词： SLC10基因;毕赤酵母;表达

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2008 年 039 卷 003 期

页码： 376-379

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： SLC10是以反式剪切引导序列为基础,通过RT-PCR从猪囊尾蚴中克隆到的一个未知基因.将猪囊尾蚴SLC10基因从重组克隆载体pGEM-SLC10扩增并酶切后,与相应酶切处理的毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9K相连接,构建重组表达载体pPIC9K-SLC10,转化大肠杆菌JM109,经PCR、酶切和测序鉴定,基因序列完全正确.纯化的重组质粒pPIC9K―SLC10用内切酶Sac I线性化,电转化毕赤酵母,使重组表达载体与酵母染色体发生同源整合;采用G418抗性梯度法筛选多拷贝重组菌株,用甲醇进行诱导表达;通过SDS-PAGE和Western―blot分析表达产物,结果表明目的蛋白得到了表达,但不具有免疫反应性.

分类号： S852.734%Q78

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