控制花色的细胞色素P450基因的cDNA克隆及限制性内切酶图谱分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 鄢波
作者: 鄢波;周晓罡;陈莉;黄兴奇
作者机构:
关键词: 花色控制基因,细胞色素P450,矮牵牛,基因克隆
期刊名称: 遗传
ISSN: 0253-9772
年卷期: 1998 年 S1 期
页码:
收录情况: 北大核心
摘要: 提取云南的一种矮牵牛的总RNA,用Oligo(dT)作为引物反转录合成cDNA第一链。以此为模板,用参照国外报道的矮牵牛细胞色素P450基因cDNA序列而自行设计并合成的一对寡核苷酸引物进行PCR扩增,并将其产物纯化后直接克隆到pGEMT载体系统中,转化大肠杆菌DH5α,在Xgal平板上筛选白色菌落,经SphⅠ和NotⅠ双酶切,鉴定所得的重组质粒中含有1580bp左右的PCR扩增片段。采用PvuⅡ、HpaⅠ、XhoⅠ、EcoRV、NdeⅠ、NsiⅠ等6种限制性内切酶进行酶切图谱分析鉴定,表明所克隆的矮牵牛细胞色素P450基因cDNA序列与国外迄今所报道的一例该基因的cDNA酶切图谱一致,提示了该基因在进化上的保守性。目前我们正在进行含该基因的植物表达载体的构建,准备花卉的转基因研究,探索产生某些蓝色花卉的可能性。
分类号: Q943,S68
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