白背飞虱酵母双杂交cDNA文库的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 薛进

作者： 薛进;李静;羊健;唐彦;梁瑶;陈剑平;张恒木

作者机构：

关键词： 白背飞虱;南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV);Gateway技术;酵母双杂交;cDNA文库

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2017 年 29 卷 12 期

页码： 2060-2067

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 白背飞虱(Sogatella furcifera Horváth)作为一种迁飞性害虫,不仅自身危害水稻,而且以持久性方式传播南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)。为了研究白背飞虱与SRBSDV之间的相互作用,需要构建一个高质量的酵母筛选文库,试验利用Gateway技术构建了白背飞虱cDNA酵母表达文库,检测分析显示,白背飞虱初级文库库容量约为1.72×10~7CFU,cDNA插入片段主要分布在500~2 000 bp,重组率约为95.8%;次级文库库容量约为1.73×10~7CFU,cDNA插入片段主要分布在400~2 000bp,重组率为100%;Y187酵母菌株的白背飞虱酵母双杂交cDNA文库库容量约5.09×10~7CFU,插入片段大小在750~2 000 bp,重组率100%,再随机挑选36个单克隆进行测序分析,所得结果与Gen Bank数据库比对显示36个克隆中含有22个不同的基因,长度在750~2 000 bp,这些分析表明,该文库可以用于酵母双杂交的后续筛选,为研究白背飞虱与SRBSDV之间的互作奠定了基础。

分类号： S435.112.3

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