猪流行性腹泻病毒SYBRⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 修金生

作者： 修金生;周伦江;陈如敬;王隆柏;陈小权

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;SYBR GreenⅠ;荧光定量RT-PCR

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2012 年 20 卷 02 期

页码： 160-165

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 参考GenBank上登录的猪流行性腹泻病毒(PEDV)株的ORF3基因序列保守型片段设计特异性引物,建立了检测PEDV的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法。在4.32×102～4.22×107copies范围内,它有很好的线性关系,其扩增相关系数为0.999,扩增效率为99%,扩增产物的熔解曲线只出现1个特异峰,无引物二聚体,熔解温度为82.23℃±0.19℃。它对传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪细小病毒、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒均检测不到荧光信号,表明其特异性强。该方法的组内变异系数为0.05%～0.87%,组间变异系数为0.32%～1.24%,重复性好。结果表明,建立的SYBRⅠ实时荧光定量RT-PCR为PEDV早期感染的诊断及定量分析提供了新的方法。

分类号： S858.28

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