基于变异PEDV的S-N融合双基因蛋白IgA-ELISA抗体检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王隆柏

作者： 王隆柏;陈秋勇;曾宪煜;吴学敏;车勇良;陈如敬;周伦江

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;S-N蛋白;IgA-ELISA抗体检测方法

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2023 年 002 期

页码： 234-239

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 猪流行性腹泻病毒（PEDV）是引发猪群腹泻的主要病原之一，给我国生猪养殖业造成了重大的经济损失。为建立IgA-ELISA抗体检测方法，本研究采用变异PEDV真核表达的S-N融合蛋白作为包被抗原，通过系列反应条件优化，建立了PEDV的IgA-ELISA抗体检测方法。该方法的最佳反应条件为包被抗原质量浓度2 mg/L,用5%BSA于37℃封闭2 h;将待检血清1∶50稀释于37℃作用1 h,加1∶20 000稀释酶标二抗于37℃作用30 min, TMB显色10 min;以D450 nm ≥0.326判定为阳性，当D450 nm ≤0.277判定为阴性，介于两者判定为可疑。检测猪瘟病毒（CSFV）、伪狂犬病病毒（PRV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、轮状病毒（PoRV）标准阳性血清抗体均为阴性，且重复性变异系数均低于10%。通过对我国福建地区304份样品（血清179份和乳汁125份）进行检测，并与商品试剂盒进行参照对比，总符合率达到93.2%以上，表明该试剂盒检测方法具有较高的特异性、敏感性和重复性，可用于对PEDV的IgA抗体检测。

分类号： S858.28

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