猪A群轮状病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立与运用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 林青

作者： 林青;康龙滨;吴瑞森;赵文娟;陈秋勇;王隆柏;周伦江;俞道进

作者机构：

关键词： 猪A群轮状病毒;Taq Man探针;荧光定量RT-PCR

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2025 年 40 卷 004 期

页码： 370-376

摘要： 【目的】建立一种猪A群轮状病毒（porcine rotavirus group A, PoRV A）快速检测方法，用于PoRV检测和流行病学调查。【方法】参考GenBank中猪A群轮状病毒（PoRVA）VP6基因序列（登录号MT025937.1、OP978242.1、PP566178.1）设计特异性引物和探针，优化反应体系中引物和探针的浓度，建立Taq Man RT-qPCR检测方法，并通过特异性、灵敏性和重复性的结果以及临床应用对该方法进行评价。【结果】该方法可特异性扩增PoRV核酸，最低检出限度为27.0 copies·μL-1，灵敏度高于普通RT-PCR 100倍；与猪流行性腹泻病毒（porcine epidemicdiarrheavirus,PEDV）、猪德尔塔冠状病毒（porcinedeltacoronavirus,PDCoV）、猪传染性胃肠炎病毒（transmissible gastroenteritis of swine, TGEV）核酸均无交叉反应；组内和组间变异系数均小于1.10%，重复性好。151份疑似PoRV的临床样品使用RT-qPCR进行检测，结果显示检出率为42.38%（64/151），优于常规RT-PCR的检出率（33.11%,50/151）。【结论】本研究基于猪A群轮状病毒VP6基因，建立了适用于PoRV A检测及其流行病学调查的Taq Man实时荧光定量PCR检测方法，具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优势，为猪轮状病毒检测和流行病学调查提供了技术手段。

分类号： S852.651

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