PMA-PCR方法快速检测VBNC状态青枯菌

文献类型： 中文期刊

第一作者： 于小龙

作者： 徐进;张昊;许景升;黄雯;胡晓梅;冯洁;王学利

作者机构：

关键词： 青枯菌;叠氮溴化丙锭;活的非可培养状态

期刊名称： 植物保护

ISSN： 0529-1542

年卷期： 2016 年 42 卷 01 期

页码： 144-149

收录情况： 北大核心

摘要： 青枯菌为应对逆境胁迫,可进入活的但非可培养状态(viable but non-culturable,VBNC)。本文利用叠氮溴化丙锭(PMA)与PCR技术相结合,建立了一种快速有效区分青枯菌死活细胞的分子检测方法。基于hrcS基因序列,设计了一对青枯菌种特异性检测引物hrcSf/hrcSr;利用PMA对青枯菌Po82菌株的细胞悬浮液样品进行预处理,随后进行常规PCR扩增。结果表明,当样品中PMA质量浓度为3μg/mL、曝光时间大于5min时,PMA可有效抑制死亡菌体细胞中的DNA扩增;且对可培养和VBNC状态细胞中的DNA扩增没有影响;本试验建立的PMA-PCR方法能有效对包括VBNC状态在内的青枯菌活菌进行检测,避免了假阳性与假阴性结果的产生。

分类号： S432.4

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