猪繁殖与呼吸综合征病毒兰州分离株ORF3基因的克隆及杆状病毒载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵娜

作者： 赵娜;田宏;祁燕蓉;满自萍;吴锦艳;尚佑军;何生虎;刘湘涛

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;ORF3基因;克隆;杆状病毒表达载体

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2009 年 18 卷 03 期

页码： 1-5

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据猪繁殖与呼吸综合症病毒已知序列(ch-1a,AY032626)设计包含完整ORF3序列的1对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV甘肃Lanzhou株的ORF3基因,将其克隆到杆状病毒载体pFastBac HTA上,经酶切鉴定、PCR鉴定筛选出阳性重组转移载体pFastBac HTA-ORF3,并对阳性质粒进行测序及序列分析;将pFastBac HTA-ORF3转化到DH10Bac感受态细胞中,与Bacmid发生位点特异性转座作用,获得重组转座子rBacmid-ORF3。成功构建了PRRSV Lanzhou株ORF3基因的杆状病毒载体,为基因工程疫苗的研制奠定了基础。

分类号： S858.28

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