稳定表达小反刍兽疫病毒N蛋白的THP-1细胞系的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李玲霞

作者： 李玲霞;张旭辉;令小东;韩生义;吴锦艳;尚佑军

作者机构： 青海大学农牧学院;青海省畜牧兽医科学院;中国农业科学院兰州兽医研究所

关键词： 小反刍兽疫病毒;N蛋白;慢病毒;细胞系;炎症小体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年 55 卷 004 期

页码： 456-462

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在利用慢病毒载体构建一种稳定表达小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白的THP-1细胞系，并验证该细胞系在PPRV激活炎症反应中的作用。首先采用PCR技术扩增N基因，进而构建慢病毒表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-Puro-N。随后将该载体与慢病毒包装质粒pLP1、pLP2和pLP/VSVG共同转染至HEK293T细胞，通过包装获得表达N蛋白的慢病毒。接着将慢病毒感染THP-1细胞，再使用嘌呤霉素筛选，之后利用细胞有限稀释法得到稳定表达N蛋白的THP-1细胞系，最后采用ELISA和Western-blot检测该细胞系对PPRV激活炎症反应的影响。结果表明，成功构建了THP-1-N细胞系，不仅该细胞系活力较好，而且具备稳定传代的能力。且稳定表达N蛋白的THP-1细胞可显著促进由PPRV感染所诱导的IL-1β表达，进而激活炎症反应。综上所述，成功建立了一种能够稳定表达N蛋白的THP-1细胞系，为PPRV感染及致病机制研究提供了重要的生物材料。

分类号： S852.65

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