实时荧光定量PCR法检测草莓镶脉病毒

文献类型： 中文期刊

第一作者： 苗立祥

作者： 苗立祥;荣宁宁;张豫超;杨肖芳;张琴;张慧琴;蒋桂华

作者机构：

关键词： 草莓镶脉病毒;SYBR Green-Ⅰ;实时荧光定量PCR

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2016 年 28 卷 06 期

页码： 1030-1036

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立一种特异、灵敏、快速检测草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)的SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR方法,根据已有的检测SVBV的引物信息,合成引物,对不同草莓品种进行PCR扩增。经过克隆、测序及序列比对得到了感染SVBV的阳性植株,利用此植株PCR扩增产物构建重组质粒作为标准品,优化了PCR反应体系,标准曲线的循环阈值(Ct值)与模板浓度有良好的线性关系(R2=0.999 1);进行了灵敏度和重复性试验,敏感性可达到10~1拷贝·μL~(-1),约为普通PCR的1 000倍,重复性好;并与常规PCR方法进行了比较,成功建立了检测SVBV的实时荧光定量PCR法。用该方法检测了部分草莓品种的DNA样品,结果表明,大部分植株都带有SVBV。该方法具有很高的灵敏性和重复性,可用来快速检测草莓植株是否感染SVBV。

分类号： S436.68

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