柔嫩艾美耳球虫CathepsinB基因的克隆表达及活性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘任强

作者： 刘任强;蔡建平;汪明

作者机构：

关键词： 柔嫩艾美耳球虫;组织蛋白酶B;克隆;表达

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN：

年卷期： 2015 年 10 期

页码： 1838-1843

收录情况： CSCD

摘要： 旨在利用同源克隆法从柔嫩艾美尔球虫(Eimeriatenella)中克隆组织蛋白酶B基因(EtcatB),为进一步研究其基因表达和基因功能奠定基础。选用未孢子化的柔嫩艾美耳球虫Houghton株,通过对已公布的柔嫩艾美尔球虫序列进行分析,利用RT-PCR的方法克隆EtcatB基因的cDNA序列,并将其重组于transE1原核表达载体中,鉴定后,重组质粒转入大肠杆菌Rosetta进行诱导表达。利用纯化所得EtcatB蛋白制备兔抗多抗,同时利用明胶酶谱法初步验证其活性。利用Real-timePCR和Westernblot的方法检测EtcatB在球虫发育不同阶段和孢子化不同阶段的表达水平...

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