胞内劳森菌0710蛋白的表达及免疫活性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张昆

作者: 张昆;杨顺利;许笑;熊铃;曲自刚;汪靖;蔡建平

作者机构:

关键词: 胞内劳森菌;重组LI0710蛋白;原核表达;免疫活性

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN:

年卷期: 2021 年 009 期

页码: 1148-1154

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了评价胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis)鞭毛相关蛋白LI0710的免疫原性,将LI0710基因插入到pET-32a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pET-32a-LI0710,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导目的蛋白表达,获得重组目的蛋白(rLI0710),通过Western-blot验证rLI0710的反应原性,同时用rLI0710免疫新西兰大白兔,获得多克隆抗体,用间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)方法验证rLI0710的免疫原性。结果显示,重组LI0710蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达;Western-blot揭示rLI-0710能够与LI试验感染小鼠血清反应,表明rLI0710具有反应原性;ELISA检测表明,rLI0710能诱导家兔产生高效价抗体,且IFA分析表明此抗体能与培养细胞中的LI反应,证明rLI0710具有良好的反应原性和免疫原性。本试验为基于LI0710蛋白的猪增生性回肠炎免疫学诊断方法的建立奠定了基础。

分类号: S852.61

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