文献类型： 中文期刊
第一作者： 李文卉
作者： 李文卉;岳龙;曲自刚;张念章;李立;闫鸿斌;贾万忠;殷宏;付宝权;次旦欧珠;米平
作者机构：
关键词： 多头带绦虫;纤连蛋白三型(FNⅢ)结构域;黏附活性;组织定位;免疫保护
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2025 年 55 卷 010 期
页码： 1357-1366
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为了挖掘多头带绦虫功能性新基因,分别以多头带绦虫基因组DNA和cDNA为模板,依据多头带绦虫基因组数据设计引物,利用PCR扩增具有FNⅢ结构域的基因序列,利用生物信息学软件对该基因进行序列分析.分别将扩增的基因片段连接至原核表达载体pGEX4T-1进行原核表达,利用Western-blot分析该重组蛋白的抗原性,验证其细胞黏附活性及进行组织定位,并开展了绵羊免疫攻虫试验.结果表明,成功克隆了 4个分别命名为TmAdh1~TmAdh4长度约为1 800bp的序列,均由3个外显子和2个内含子组成;序列分析发现4个基因含有N端信号肽和1个FNⅢ结构域,基因进化分析发现TmAdh1~TmAdh4蛋白属于带科绦虫抗原性蛋白家族的一个新的亚类.分别构建重组质粒并转化大肠杆菌BL21感受态细胞,成功表达了约39.0、38.1、38.9和37.8 kDa的重组蛋白.Western-blot结果表明rTmAdh3蛋白能被脑多头蚴病绵羊血清识别.细胞黏附活性试验表明rTmAdh1~rTmAdh4对CHO和NRK细胞都具有黏附活性.免疫组化结果表明,TmAdh1~TmAdh4主要分布于原头节的顶突.重组蛋白免疫绵羊保护性试验结果显示,rTmAdh1、rT-mAdh3和rTmAdh4免疫绵羊后抗体水平上升,三免后达到峰值,攻虫后抗体水平逐渐下降.用多头带绦虫虫卵感染绵羊后,rTmAdh1、rTmAdh3、rTmAdh4免疫组绵羊的脑包囊数较对照组分别减少61.71%、53.17%、50.76%.本研究为多头带绦虫新基因功能性研究奠定了基础.
分类号： S852.734
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