非洲猪瘟病毒分子信标荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 钟健豪

作者： 钟健豪;高寒;杨吉飞;邝麒元;高校鹏;李跃;牛庆丽;关贵全;殷宏;张桂红;卢刚;孙彦阔

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;分子信标;实时荧光定量;检测方法

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年 55 卷 002 期

页码： 203-209

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本试验旨在利用新型荧光探针-分子信标建立一种检测非洲猪瘟病毒（ASFV）的分子信标实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法。根据ASFV B646L基因序列的保守区域设计特异性引物和分子信标探针，通过反应体系和反应条件的优化，建立标准曲线，测定本方法的敏感性、特异性和重复性；并通过检测207份临床样本，比较本方法与国家标准qPCR方法和商品化ASF检测试剂盒之间的符合率以及得出kappa系数。结果显示，该方法标准曲线的线性关系良好，相关系数为0.997 4，最低检出浓度为1 copies/μL，且与5种常见猪源病原体之间无交叉反应，组内与组间的变异系数均小于1.81%；临床样品检测结果显示，本方法与国家标准q PCR方法和商品化ASF检测试剂盒的总体符合率分别为97.10%和98.55%,kappa系数分别为0.910 4和0.955 6。结果表明，本试验建立的ASFV检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好、检测结果可靠，为ASF的检测和该病的防控提供了技术支持。

分类号： S852.651

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