荧光定量PCR方法检测禽白血病病毒的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张在平

作者： 张在平;孟庆文;马学恩

作者机构：

关键词： 禽白血病;pol基因;荧光定量PCR

期刊名称： 内蒙古农业大学学报(自然科学版)

ISSN： 1009-3575

年卷期： 2009 年 30 卷 04 期

页码： 15-19

收录情况： 北大核心

摘要： 根据禽白血病病毒各亚群pol基因序列相对保守的特点,在其保守区内设计了1对引物,进行RT-PCR反应,扩增产物为214 bp,将该产物连接T载体作为Real-time PCR反应的标准品,利用SYBR Green I染料进行Real-time PCR反应,建立了标准曲线,并进行反应灵敏性、特异性和重复性试验。试验结果表明:标准曲线线性关系R值均为0.999以上,检测极限约为8.21E+01拷贝数质粒DNA,比RT-PCR灵敏100倍以上;特异性分析表明只有禽白血病病毒能检测到特异性的熔解度峰值;批内和批间重复性试验的变异系数均小于5%;用已建立的方法对人工感染SPF鸡的不同组织进行3次重复检测,病毒RNA的检出率为100%。以上结果表明:该方法稳定可靠,为禽白血病的早期诊断建立了特异、灵敏和快捷的方法。

分类号： S855.3

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