Cladosporium tianshanense SL19来源的新型葡萄糖氧化酶的基因克隆及性质研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 葛建忠
作者: 葛建忠;尹亚昕;蒋肖;刘伟娜;姚斌;罗会颖
作者机构:
关键词: 葡萄糖氧化酶;枝孢菌SL19;基因克隆;基因表达;性质研究
期刊名称: 中国农业科技导报
ISSN: 1008-0864
年卷期: 2019 年 21 卷 12 期
页码: 49-57
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 葡萄糖氧化酶(GOX)已广泛应用于各种工业生产中。目前,除了曲霉和青霉属来源的GOX外,鲜有新型GOX被报道。经基因克隆和序列同源性分析,Cladosporium tianshanense SL19来源的葡萄糖氧化酶基因CtgoxB是一个新基因,该基因全长1 707 bp,无内含子,编码568个氨基酸,N-端第1~16个氨基酸为信号肽,与已报道的GOX序列最高一致性为35%。CtgoxB在毕赤酵母中实现异源表达,但重组蛋白CtGOXB未检测到GOX活性。通过序列和结构分析,同源重组构建的突变体CtGOXB-C1最终恢复了GOX活性。经SDS-PAGE鉴定,重组蛋白CtGOXB-C1表观分子量约为120 kDa,大于理论分子量(61.6 kDa)。经酶学性质测定,CtGOXB-C1比活为123.8 U/mg,在pH 8.0和30℃条件下具有最高的酶活,且在10℃时依然维持65%的酶活,具有嗜低温特性。CtGOXB-C1在pH 6.0~9.0条件下保温1 h后,剩余酶活维持在80%以上,可以在中碱性条件下维持较高酶活,并且对表面活性剂SDS具有较强的抗性。这些性质表明CtGOXB-C1在水产饲料和洗涤剂等行业中具有良好的应用潜力。
分类号: Q55`Q78
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