美国白蛾基因组DNA提取及RAPD反应条件优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 阚国仕

作者： 李雪;王海鸿;丁建云

作者机构：

关键词： 美国白蛾;RAPD;正交设计;DNA提取

期刊名称： 植物保护

ISSN： 0529-1542

年卷期： 2009 年 35 卷 03 期

页码： 84-88

收录情况： 北大核心

摘要： 用改进的SDS法从无水乙醇浸泡美国白蛾幼虫标本中提取到高分子量的可用于RAPD扩增的基因组DNA。用正交试验对影响RAPD扩增的条件进行优化得到最佳反应体系:20μL反应体系中,模板浓度1.25 ng/μL、引物浓度1.2 ng/μL、dNTP浓度0.2 mmol/L、Mg2+浓度3.0 mmol/L、TaqDNA聚合酶用量2.5 U。确定最佳退火温度为38℃。PCR反应条件:94℃30 s、38℃60 s、72℃60 s 35个循环后,72℃延伸5 min。为在分子水平上讨论美国白蛾种群的遗传分化提供基础。

分类号： S433

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