文献类型: 中文期刊
第一作者: 王成
作者: 王成;武书庚;张海军;岳洪源;翟永功;齐广海
作者机构:
关键词: 氧化应激;骨骼肌卫星细胞;MAPK;p38;JNK
期刊名称: 中国农业科学
ISSN: 0578-1752
年卷期: 2010 年 43 卷 20 期
页码: 4286-4294
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】在地塞米松(DEX)诱导骨骼肌卫星细胞氧化应激的体外条件下,筛选丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号系统中起关键作用的信号通路。【方法】将体外培养的肉仔鸡胸肌骨骼肌卫星细胞(SCs)分别进行处理:Ⅰ、对照组;Ⅱ、DEX;Ⅲ、p38MAPK抑制剂;Ⅳ、DEX+p38MAPK抑制剂;Ⅴ、JNK抑制剂;Ⅵ、DEX+JNK抑制剂;Ⅶ、ERK5抑制剂;Ⅷ、DEX+ERK5抑制剂;Ⅸ、ERK1/2抑制剂;Ⅹ、DEX+ERK1/2抑制剂。除处理Ⅰ和处理Ⅱ外,其它处理首先用抑制剂预处理30min,弃去培养基后,再按处理设置分别加入含DEX的培养基或者正常培养基继续处理24h。处理结束后,分别测定细胞培养液中丙二醛(MDA)、活性氧自由基(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽硫转酶(GST)含量或活性;同时采用RT-PCR方法检测通路蛋白及SOD与GST基因表达量。【结果】抑制剂单独处理组MDA和ROS的产生量显著低于DEX处理(P<0.05);DEX+ERK5抑制剂处理与DEX+ERK1/2抑制剂处理的MDA和ROS产生量显著高于ERK5抑制剂处理和ERK1/2抑制剂处理(P<0.05);DEX+p38MAPK抑制剂处理与DEX+JNK抑制剂处理组的MDA和ROS产生量与p38MAPK处理和JNK处理的差异不显著(P>0.05)。抑制剂单独处理组的SOD和GST活性比DEX处理高(P<0.01);DEX+ERK5抑制剂处理与DEX+ERK1/2抑制剂处理的SOD和GST活性极显著低于ERK5抑制剂处理组和ERK1/2抑制剂处理组(P<0.01),DEX+p38MAPK抑制剂处理与DEX+JNK抑制剂处理的SOD和GST活性与p38MAPK抑制剂处理和JNK抑制剂处理的差异不显著(P>0.05)。基因表达结果表明,DEX能够抑制GST和SOD基因的表达,抑制率达37%以上。与抑制ERK5和ERK1/2通路不同,抑制p38MAPK和JNK通路后,DEX对GST和SOD基因的表达无明显抑制作用。【结论】在DEX诱导的肉仔鸡胸肌骨骼肌SCs产生的氧化应激过程中,p38MAPK和JNK通路起着关键作用。
分类号: S831
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