喹乙醇检测单抗制备中细胞融合条件的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王磊

作者： 王磊;李建喜;张景艳;王学智;杨志强

作者机构：

关键词： 喹乙醇;单克隆抗体;细胞融合;聚乙二醇;优化

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2013 年 03 期

页码： 81-84+172

收录情况： 北大核心

摘要： 为了优化抗喹乙醇单克隆抗体制备中聚乙二醇(PEG)诱导细胞融合的最适条件,试验采用流式细胞仪确定SP2/0细胞的对数生长期,以融合率和阳性率为评价指标,分析血清加入量、500 mL/LPEG-1000溶液方法及反应时间和次黄嘌呤、氨基蝶呤、胸腺嘧啶脱氧核苷(HAT)加入时间对SP2/0细胞与脾细胞融合效果的影响。结果表明:150,200 mL/L胎牛血清融合率分别为86.5%、88.5%;生理盐水和无血清DMEM配制的500 mL/L PEG-1000融合率和阳性率分别为61.4%、3.1%,30.2%、1.0%;PEG-1000反应1.75,3.00 min融合率和阳性率分别为61.4%、3.1%,74.5%、6.3%;融合后培养0,24 h加入HAT,结果融合率和阳性率分别为95.8%、17.7%,94.3%、26.0%。说明150 mL/L胎牛血清、500 mL/L PEG-1000生理盐水、反应3.00 min、培养24 h后加入HAT时,细胞融合率和阳性率较高,是抗喹乙醇单克隆抗体制备中PEG诱导细胞融合的最适条件。

分类号： S859.84

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