文献类型： 中文期刊
第一作者： 陈美荣
作者： 陈美荣;林伟东;宋天琪;鑫婷;郭晓宇;黄克和;贾红
作者机构：
关键词： 犬瘟热病毒(CDV);H基因;昆虫杆状病毒表达系统
期刊名称： 中国畜牧兽医
ISSN： 1671-7236
年卷期： 2018 年 08 期
页码： 2041-2048
收录情况： 北大核心
摘要： 试验旨在获得具有天然构象且抗原性良好的犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)强毒株的H蛋白。以分离的CDV强毒株BJ16B2为模板,RT-PCR特异扩增H基因,克隆至表达载体pFastBacTMHTA上,酶切及测序鉴定正确后比对分析H基因同源性,并将重组质粒pFastBacTMHTA-H转化大肠杆菌DH10BacTM感受态细胞,同源重组构建穿梭质粒rBacmid-H,将重组穿梭质粒转染Sf9昆虫细胞,拯救重组杆状病毒。利用IFA和Western blotting对获得的重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。结果显示,重组质粒pFastBacTMHTA-H酶切测序鉴定正确,该H基因属于Asia-1强毒株,与参考毒株的核苷酸和氨基酸同源性分别为89.8%~99.3%和89.6%~99.5%。在杆状病毒中所表达的H蛋白能与CDV阳性血清及His-tag抗体发生特异性反应,IFA鉴定能够产生特异性绿色荧光,且在68ku左右出现蛋白条带,表明H蛋白成功表达且具有良好的反应原性。本研究获得了具有天然构象及良好抗原性的CDV重组H蛋白,为后续蛋白结构和抗原特性差异分析、单抗制备、CDV亚单位疫苗的开发奠定了基础。
分类号： S852.65
- 相关文献
[1]貉源犬瘟热病毒的分离鉴定及其H基因的序列分析. 郭抗抗[1,闫喜军,柴秀丽,张蕾,赵建军. 2013
[2]犬瘟热病毒受体及其跨宿主感染. 王雅文,赵建军,闫喜军. 2017
[3]犬瘟热病毒感染小鼠脾淋巴细胞所引起的主要基因表达变化. 仝明薇,易立,程悦宁,王建科,赵航,程世鹏,孙长英,王文宪. 2014
[4]抗猫细小病毒嵌合抗体基因在昆虫细胞中的表达与鉴定. 薛雨佳,宋彩玲,赵爽爽,李彤彤,王文静,张云,刘明. 2019
[5]水貂阿留申病病毒VP2蛋白基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达. 王振军,吴威,闫喜军,呼延良浩,朱春生. 2013
[6]植酸酶基因在家蚕-杆状病毒表达系统中的表达及其酶学特性. 王文兵,姚斌,肖庆利,季平,汪生鹏,何家禄,吴祥甫. 2003
[7]牛冠状病毒S1蛋白的真核表达及间接ELISA方法的建立与应用. 黄金,李思远,毛立,蔡旭航,谢玲玲,王府,周华,李基棕,李彬. 2024
[8]牛抗菌肽Bac7-Bac5-βdefense串联基因在昆虫杆状病毒系统中的表达及其产物的活性分析. 赵昆,刘思国,王春来,宫强,迟磊,刘建东,王勇,云孟克,刘慧芳,孙延鸣. 2008
[9]牛抗菌肽Bac7-Bac5-β defense串联基因在昆虫杆状病毒系统中的表达及其产物的活性分析. 赵昆,刘思国,王春来,宫强,迟磊,刘建东,王勇,云孟克,刘慧芳,孙延鸣. 2008
[10]虎源犬瘟热病毒核酸疫苗构建及免疫原性初步研究. 张贺,翟少伦,罗满林,吕殿红,温肖会,魏文康. 2018
[11]犬瘟热病毒Lederle株H,N全基因序列分析及表达研究. 杨应丽,杨兵,赖平安,王金洛,徐福洲. 2007
[12]小反刍兽疫病毒H基因或F基因重组山羊痘病毒活载体疫苗的研究. 李继东,蒙学莲,朱学亮,李雪强,尤亚南. 2015
[13]小反刍兽疫病毒H基因胞外区的表达与分析. 蒙学莲,窦永喜,朱学亮,骆学农,才学鹏. 2014
[14]粪产碱菌（Alcaligenes faecalis）基因文库的构建和nifH基因同源顺序的克隆. 海伟力,郑洪刚,尤崇杓,王斌. 1992
[15]济南市犬瘟热病毒H基因遗传进化分析. 王召阳,蒋亚君,刘雪婷,侯绍华,郭晓宇,鑫婷,朱鸿飞,贾红. 2021
[16]致病性犬瘟热病毒CDV-JT1株的分离与鉴定. 王秀东,谭斌,陈微晶,陈立志,武华. 2010
[17]甘肃犬瘟热病毒流行株N蛋白和H蛋白基因的序列分析. 王小辉,王旭荣,郭庆勇,李建喜,李世宏. 2011
[18]表达小反刍兽疫病毒H基因重组腺病毒的构建及对小鼠免疫原性的试验. 王芳,周国辉,曹丽艳,李一经,于力. 2011
[19]表达小反刍兽疫病毒H基因的山羊痘病毒通用转移载体的构建及鉴定. 邵长春,张强,吴国华,颜新敏,李健,王建科,卢晓丽,赵志荀,崔丽凡,高世功. 2009
[20]小反刍兽疫病毒H基因的原核表达与鉴定. 李伟,李刚,邱文英,贾凤芹,曾妮,吴素丽. 2009
作者其他论文 更多>>
-
枯草芽胞杆菌对大肠杆菌返饲母猪繁殖性能和健康度的影响
作者：刘建新;葛雷;屈浩博;黄克和
关键词：枯草芽胞杆菌;大肠杆菌返饲;繁殖性能;氧化应激;炎症
-
非洲猪瘟病毒CD2v阻断ELISA检测方法的初步建立与应用
作者：王彩霞;于浩洋;吴佳俊;杨振;贾红;仇松寅;刘晓飞;吴绍强;冯春燕;林祥梅
关键词：非洲猪瘟病毒;CD2v蛋白;阻断ELISA;敏感性;特异性
-
松杉灵芝发酵菌丝体中的三萜化合物
作者：郭晓宇;程池露;滕李铭;员瑗;张劲松;潘新华;潘峰;戴玉成;冯娜
关键词：松杉灵芝;液体发酵;次生代谢产物;结构鉴定
-
非洲猪瘟病毒MGF360-13L蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
作者：陈世钰;蒋亚君;鑫婷;崔帅;王洋;郭晓宇;贾红;朱鸿飞
关键词：非洲猪瘟病毒;MGF360-13L基因;序列分析;原核表达;多克隆抗体
-
野生型非洲猪瘟病毒多重数字PCR方法的建立
作者：李松达;蒋亚君;庞忠宝;黄颖;翟文竹;朱鸿飞;赵晓民;贾红
关键词：非洲猪瘟病毒;多重荧光定量PCR;微滴式数字PCR
-
非洲猪瘟病毒O174L蛋白的真核表达载体构建及分子特征分析
作者：沙嘎那日·吉日木图;林晓;沈兆基;郭肖蓉;李奎;贾红;周荣
关键词：非洲猪瘟病毒;O174L基因;真核表达;分子特征
-
2021-2022年赤羽病通过牛羊调运传入山东省的定量风险评估研究
作者：李超;沈朝建;魏玉荣;张祯涛;王玉英;张毅;何微;黄克和;薛峰
关键词：赤羽病;定量风险评估;调运;隔离检疫
