渗透压诱导表达重组Clostridium thermosulfurogenes β-淀粉酶基因

文献类型： 中文期刊

第一作者： 蒙健宗

作者： 梁莲华;周礼芹;罗兆飞;王青艳

作者机构：

关键词： 渗透压启动子;诱导;热硫梭菌;β-淀粉酶;表达

期刊名称： 食品与发酵工业

ISSN： 0253-990X

年卷期： 2011 年 37 卷 06 期

页码： 6-10

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以热硫梭菌Clostridium thermosulfurogenes基因组为模板,PCR扩增出β-淀粉酶基因;将该基因克隆到pET-22b(+)载体上,转入大肠杆菌BL21-SI,采用NaCl形成的高渗透压诱导表达。研究了不同诱导条件对重组菌产β-淀粉酶的影响,结果以菌体密度达到OD600为0.6,诱导剂NaCl浓度为0.6 mol/L,诱导温度为35℃最佳。重组菌以LBON为培养基分批发酵时,由于营养限制,菌体密度OD600仅为4.60,β-淀粉酶活力为118U/mL。采用pH-Stat分批补料发酵时,在菌体密度仅是分批发酵的2.35倍的条件下,得到6.12倍的产酶量,酶活力达722U/mL。重组β-淀粉酶70℃水解可溶性淀粉3h的麦芽糖转化率为62.2%,高于大麦β-淀粉酶的转化率。

分类号： Q78

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