文献类型: 中文期刊
第一作者: 罗会颖
作者: 罗会颖;姚斌;袁铁铮;王亚茹;史秀云;伍宁丰;范云六
作者机构:
关键词: 高比活植酸酶;基因改造;毕赤酵母;高效表达
期刊名称: 生物工程学报
ISSN:
年卷期: 2004 年 01 期
页码: 78-84
收录情况: CSCD
摘要: 高效表达高比活植酸酶是进一步提高植酸酶发酵效价、降低植酸酶生产成本的一个有效途径。对源于Escherichiacoli的高比活植酸酶基因appA,按照毕赤酵母(Pichiapastoris)密码子的偏爱进行了密码子优化改造。该改造后的基因appAm按正确的阅读框架融合到毕赤酵母表达载体pPIC9上的α因子信号肽编码序列3′端,通过电击转化得到重组转化子。对重组毕赤酵母的Southernblotting分析证实植酸酶基因已整合到酵母基因组中,并确定了整合基因的拷贝数。Northernblotting分析证实植酸酶基因得到了正常转录。SDSPAGE分析和表达产物的研究表明,植酸酶...
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