猪源牛病毒性腹泻病毒SD0803株细胞传代研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙春清

作者： 孙春清;邓宇;张宏彪;龙进学;韦祖樟;童光志;袁世山

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒;病毒传代;全长测序;Real-timePCR;多步生长曲线

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2012 年 20 卷 02 期

页码： 22-28

摘要： 为研究猪源牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)生物学特性,将本实验室分离得到的SD0803毒株在马-达氏牛肾细胞(mardin-darby bovine kidney,MDBK)上连续传40代,提取第40代病毒基因组RNA,设计扩增及测序引物,用RT-PCR方法分5段扩增第40代病毒基因片段,并进行全长测序,利用DNASTAR软件进行序列拼接及分析,与亲代病毒SD0803序列比对分析;用Real-time PCR方法测定第1、10、20、30和40代细胞上清中的病毒复制效率,并绘制多步生长曲线。测序结果表明,第40代病毒与亲代病毒核苷酸序列的同源性为99.8%,氨基酸序列的同源性为99.6%,其中有23处发生核苷酸突变,14处为有义突变,氨基酸变化主要集中在E2和NS5B区域。多步生长曲线显示,传代病毒和亲本病毒均能在MDBK细胞上获得较高的复制效率,并有着相似的生长特性,复制效率基本一致。本次研究为研制猪源BVDV疫苗做好了物质储备,为下一步研究其致病性和抗原性奠定基础。

分类号： S852.659.6

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