抗猪甲型H1N1流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的制备与特性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 张健

作者: 张健;陈艳;乔传玲;杨焕良;唐续;辛晓光;陈化兰

作者机构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室

关键词: 甲型H1N1猪流感病毒;HA;MAb

期刊名称: 畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2011 年 42 卷 05 期

页码: 711-716

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究旨在制备猪甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)蛋白的特异性单克隆抗体。采用RT-PCR方法扩增猪甲型H1N1流感病毒的HA基因,将其克隆至真核表达载体pCAGGS上,获得重组质粒pCAGGS-HA,转染293T细胞,通过间接免疫荧光(IFA)检测表明HA蛋白在293T细胞中得到表达。将pCAGGS-HA以100μg.只-1剂量免疫5周龄BALB/c小鼠,获得4株稳定分泌抗HA蛋白单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为11G7、3C10、3G3和2B11。其中11G7诱导小鼠产生的腹水HI效价为14log2,中和效价为1∶8 192,HI试验结果进一步表明11G7只与甲型H1N1流感病毒发生反应,而不与其他H1N1、H1N2、H3N2、H5N1及H9N2亚型流感病毒反应。该MAb的制备将为建立猪甲型H1N1流感病毒与传统亚型SIV的鉴别诊断方法奠定基础。

分类号: S858.28

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