猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆及杆状病毒表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵娜

作者： 赵娜;田宏;吴锦艳;满自萍;尚佑军;何生虎;刘湘涛

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;ORF5基因;克隆;杆状病毒表达

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2009 年 24 卷 01 期

页码： 87-90

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据猪繁殖与呼吸综合症病毒已知序列(ch-1a,AY032626)设计包含完整ORF5序列的1对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV甘肃LZH株的ORF5基因,将其克隆到杆状病毒载体pFastBacHTA上,经酶切鉴定、PCR鉴定筛选出阳性重组转移载体pFastBacHTA-ORF5,并对阳性质粒进行测序及序列分析;将pFastBacHTA-ORF5转化到DH10Bac感受态细胞中,与Bacmid发生位点特异性转座作用,获得重组转座子rBacmid-ORF5;并成功构建了PRRSV LZH株ORF5基因的杆状病毒载体,为基因工程疫苗的研制奠定了基础。

分类号： S852.65

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