基于H蛋白表位合成肽的小反刍兽疫病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 钱榜

作者： 钱榜;李彦敏;朱学亮;张学燕;Niyokwishimira Alfred;窦永喜;张志东

作者机构：

关键词： 小反刍兽疫病毒;H蛋白;B细胞表位;iELISA

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN：

年卷期： 2021 年 001 期

页码： 144-153

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在建立针对小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus, PPRV）H蛋白抗体的iELISA检测方法。以筛选的H蛋白B细胞表位为基础,选择反应原性较好的4个抗原表位肽串联后合成作为包被抗原,优化各步反应条件及筛选各种缓冲液,并确定检测临界值。经优化后,多表位抗原肽的最佳包被量为1.5×10-6μg·孔-1,血清临界稀释度为1∶100,酶标二抗最佳稀释度为1∶80 000;包被液为碳酸氢盐缓冲液,血清和二抗稀释液均为PBST溶液,封闭液为2%BSA溶液;阴、阳性临界值为0.25。不同血清的检测结果表明,批内及批间检测结果变异系数均小于10%,证明该方法具有良好的稳定性;对羊痘、口蹄疫、蓝舌病阳性血清的检测均为阴性,说明该方法具有良好的特异性;与ID-Vet公司的cELISA试剂盒对306份临床血清平行检测,两者相对符合率为92.81%。该研究所建立的PPRV H蛋白抗体iELISA检测方法特异、稳定、敏感,操作比cELISA简便快捷,省时省力,可用于临床小反刍兽疫抗体检测。

分类号： S852.65

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