猪流行性腹泻病毒N蛋白与VeroE6核仁蛋白Fibrillarin的亚细胞定位分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 石达

作者： 石达;陈建飞;时洪艳;张志榜;冯力

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;核衣壳蛋白;纤维蛋白;共定位

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2011 年 33 卷 11 期

页码： 833-836

收录情况： CSCD

摘要： 为鉴定猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与VeroE6细胞核仁fibrillarin蛋白的亚细胞定位的特征。本实验参照GenBank中人细胞fibrillarin基因(M59849.1)序列，设计并合成特异性引物，利用RT-PCR方法扩增了VeroE6细胞的fibrillarin基因，并将其克隆于真核表达载体pDsRed2-N1中，构建重组质粒pDsRed-Fib。将pDsRed-Fib与本实验室构建的含有PEDVN基因的重组质粒pAcGFP-N，共转染VeroE6细胞。Westernblot结果表明fibrillarin及N融合蛋白在转染的VeroE6细胞中均获得表达；利用共聚焦显微镜观察显示在共转染VeroE6细胞中PEDVN蛋白与VeroE6细胞核仁中的fibrillarin发生共定位。该结果为进一步研究PEDV和核仁蛋白相互作用奠定基础。

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