影响农杆菌介导旱稻转化效率主要因素的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 石云鹭

作者： 石云鹭;丁在松;张彬;张桂芳;赵明

作者机构：

关键词： 旱稻;农杆菌转化;共培养;分化

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2007 年 33 卷 07 期

页码： 1135-1140

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 针对旱稻在基因工程中转化效率低这一难题,以4个旱稻品种为对象,对农杆菌介导的遗传转化的各个步骤进行了优化试验,结果表明NB(N6 macro elements;B5 microelements and vitamins;proline 500mg L-1,L-Glutamine 500mg L-1,casamino acid 300mg L-1,sucrose 30 gL-1,2,4-D2mg L-1,agar8g L-1,pH5.8)培养基适合于旱稻愈伤组织诱导;AAM-AS(Na2HPO4.2H2O339.2mg L-1;KCl2.95g L-1;MgSO4·7H2O500mg L-1;CaCl2114.4mg L-1;MnSO4·4H2O10mg L-1;H3BO33mg L-1;ZnSO4·7H2O2mg L-1;KI0.75mg L-1;NaMO40.25mg L-1;CuSO4.5H2O0.0387mg L-1;CoCl2.6H2O0.025mg L-1;VB10.5mg L-1;VB60.5mg L-1;烟酸0.5mg L-1;肌醇100mg L-1;甘氨酸7.5mg L-1;精氨酸174mg L-1;谷氨酰铵876mg L-1;casamino acid 500mg L-1;蔗糖68.5g L-1;葡萄糖35g L-1;AS200μmol L-1pH5.2)是农杆菌的最佳重悬液;对NPT(new plant type,NPT)这种侵染后易水渍化品种,滤纸法共培养可将其抗性愈伤发生率提高15倍以上;筛选及分化前对抗性愈伤组织进行2d的干燥培养可显著加快愈伤组织分化进程;在分化培养基中加入AgNO3有助于提高分化率;而短期高浓度的CuSO4处理可显著提高分化率。利用此体系获得了一大批PCR鉴定阳性的转基因植株;Southern blot检测证明外源基因大多数以单拷贝形式整合在转基因植株中。

分类号： S511.6

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