鸡痘病毒ORF127蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 华炯钢

作者： 华炯钢;朱寅初;叶加林;张存;陈柳;倪征;付媛;霍苏馨;云涛

作者机构：

关键词： 鸡痘病毒;ORF127蛋白;间接ELISA;抗体

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2025 年 37 卷 010 期

页码： 2057-2065

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立快速、准确的鸡痘病毒（fowlpox virus,FPV）抗体检测方法，将FPV ORF127基因的抗原表位区域克隆于p ET-28a（+）原核表达载体，诱导表达并纯化获得FPV ORF127截短蛋白，以纯化的蛋白作为包被抗原，通过优化各反应条件，建立检测FPV抗体的间接ELISA方法，经特异性、敏感性、重复性等试验和临床血清样本检测进行系统验证。结果显示，间接ELISA检测FPV抗体的最佳反应条件为:包被抗原质量浓度为10μg·m L-1，待检血清稀释度为1∶100，酶标二抗稀释度为1∶25 000;特异性试验结果显示，除FPV阳性血清呈阳性反应外，与其他6种病毒（新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、鸡传染性法氏囊病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、禽腺病毒4型、火鸡疱疹病毒）的阳性血清均无交叉反应;敏感性结果显示，FPV阳性血清稀释800倍后检测结果仍为阳性;批内、批间重复试验结果显示，批内变异系数为1.81%～7.07%，批间变异系数为2.12%～7.16%，均小于10%。临床血清样品检测结果显示，180份血清样本总阳性率为79.4%（143/180）。上述结果表明，本研究建立的间接ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性和稳定性好，可为免疫鸡群FPV抗体水平监测和FPV流行病学调查提供技术支撑。

分类号： S852.65

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