文献类型： 中文期刊
第一作者： 郑乾明
作者： 郑乾明;晏霜;解璞;王红林
作者机构：
关键词： 火龙果;细胞壁转化酶;质外体;酵母表达;蔗糖分解
期刊名称： 生物技术通报
ISSN： 1002-5464
年卷期： 2025 年 41 卷 008 期
页码： 267-275
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 【目的】细胞壁转化酶（cell wall invertase, CWIN）分解蔗糖生成葡萄糖和果糖，是高等植物糖代谢关键酶。探讨CWINs在红肉火龙果（Selenicereus monacanthus）果实可溶性糖代谢中的生理功能，为调控和改良果实风味和品质提供基础。【方法】提取成年态茎和各发育时期果肉的总蛋白，检测CWIN酶活性，分析SmCWIN家族序列结构域，利用基因数字表达谱和实时荧光定量PCR检测SmCWINs在花、茎、果皮和果肉中的表达模式，通过瞬时转化烟草叶肉细胞进行SmCWIN6的亚细胞定位，利用酿酒酵母表达并提取总蛋白，离体检测SmCWIN6的酶活性。【结果】红肉火龙果成年态茎的CWIN酶活性较低，在果实授粉后23 d时最高，此后，随果实成熟明显下降。红肉火龙果SmCWIN家族仅SmCWIN6含有蔗糖分解相关的结构域和保守的氨基酸残基。SmCWIN6在果实中表达，主要在授粉后20-25 d表达，此后，随果实发育逐渐下调表达，果实成熟时（授粉后30 d）表达微弱。亚细胞定位结合质壁分离试验表明，SmCWIN6蛋白定位于质外体，可能位于细胞壁。经酵母表达获得重组蛋白并离体检测，SmCWIN6可分解蔗糖产生葡萄糖和果糖，在p H=3.0具有最大酶活性。【结论】SmCWIN6在质外体分解蔗糖产生葡萄糖和果糖，主要在果实授粉后20-25 d表达，参与果实发育期间胞外可溶性糖代谢。
分类号： S667.9%Q943.2
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