猪O型FMDV重组多表位抗原基因的克隆表达及免疫学鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高明

作者： 高明;邵军军;林彤;赵付荣;刘泽众;常惠芸;吴润

作者机构：

关键词： 猪O型口蹄疫病毒;表位;佐剂;疫苗

期刊名称： 甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2017 年 52 卷 01 期

页码： 1-6

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】制备猪O型FMDV广谱多表位疫苗,并筛选最适合的免疫佐剂.【方法】选取O型FMDV 3个毒株VP1蛋白的优势表位,设计并合成重复串联表位基因3FoEN2,并克隆猪IgG重链恒定区基因.利用BamHⅠ,EcoRⅠ等位点将2个基因依次克隆到pProEX-HTb载体,构建重组质粒pE-IgG并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞.以IPTG诱导表达得到融合蛋白pE-IgG,经SDS-PAGE电泳分析,Western-blotting鉴定.分别用5种佐剂ISA206、ISA201、IMS1313、603、ISA61乳化融合蛋白配制疫苗免疫BALB/c雌鼠,间接ELISA方法测定抗体水平.【结果】重组蛋白以包涵体形式正确表达,大小为45kU,且能与感染O型FMDV的猪的阳性血清发生特异性免疫反应;ISA201佐剂试验组刺激机体产生的抗体水平最高.【结论】pE-IgG蛋白具有很强的免疫原性,与ISA201佐剂混合制备成的猪O型口蹄疫病毒多表位疫苗可刺激动物机体产生高水平抗体,是具有良好开发前景的疫苗.

分类号： S852.65

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