CRISPR/Cas9介导的荔枝霜疫霉基因组编辑系统的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 司徒俊键

作者: 司徒俊键;江立群;邵毅;孔广辉;习平根;姜子德

作者机构:

关键词: 荔枝霜疫霉;基因编辑;CRISPR/Cas9;RXLR

期刊名称: 菌物研究

ISSN: 1672-3538

年卷期: 2020 年 003 期

页码: 181-188

摘要: 参考大豆疫霉的CRISPR/Cas9基因组编辑技术体系,针对荔枝霜疫霉RXLR效应蛋白编码基因Pl Avh133设计了20 bp的sgRNA靶向序列,结合同源替换的方式对该基因进行敲除.利用聚乙二醇(PEG)介导的原生质体转化,共获得了58个具有G418抗性的转化子,通过PCR和测序分析证明其中5个转化子的Pl Avh133基因被敲除,敲除效率约为8.6%.荧光定量PCR分析证实Pl Avh133敲除突变体中该基因不表达.本研究结果为荔枝霜疫霉的基因功能研究提供了重要的技术基础.

分类号: S436.67%Q943.2

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