绿色木霉(Trichoderma viride)基因组文库构建及其CBH I基因阳性克隆筛选
文献类型: 中文期刊
第一作者: 王建荣
作者: 王建荣;张曼夫
作者机构:
关键词: 木霉;基因组文库;分子杂交;纤维素酶基因;克隆
期刊名称: 上海农业学报
ISSN: 1000-3924
年卷期: 1993 年 03 期
页码: 1-5
摘要: 用绿色木霉核DNA部分酶解片段与噬菌体λEMBL3载体左右臂连接,并用高效价包装蛋白对重组分子进行体外包装,侵染宿主菌后,构建了含1.92×10_6个重组噬菌体的绿色木霉基因组文库。以李氏木霉纤维素酶CBH Ⅰ基因的5′、3′两个末端片段为探针,对所建立的基因组文库作轮回噬菌斑原位杂交,筛选到含绿色木霉CBH Ⅰ基因的阳性克隆7个,随机取其中三个克隆进一步用李氏木霉CBH Ⅰ、CBHⅡ基因的5′、3′四个末端片段探针作交叉斑点杂交,证明本实验确实克隆了很可能为全长的绿色木霉CBH Ⅰ基因,并提示CBH Ⅰ与CBHⅡ基因的末端序列之间不存在同源性。
分类号:
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