文献类型: 中文期刊
第一作者: 袁铁铮
作者: 袁铁铮;姚斌;罗会颖;王亚茹;伍宁丰;范云六
作者机构:
关键词: 嗜酸性α-淀粉酶;酸热脂环酸杆菌;毕赤酵母;基因表达
期刊名称: 生物工程学报
ISSN: 1000-3061
年卷期: 2005 年 21 卷 01 期
页码: 82-87
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 从嗜酸耐热的酸热脂环酸杆菌Alicyclobacillusacidocaldarius中克隆到α_淀粉酶的基因 (amy) ,该基因全长 390 3bp ,编码130 1个氨基酸 ,理论分子量约 14 0kD。将基因amy分别克隆到大肠杆菌E .coli表达载体pET_2 2b(+)和毕赤酵母P .pastoris表达载体pPIC9α ,并在大肠杆菌和毕赤酵母中得到了表达 ,表达产物具有淀粉酶的活性。对酵母中表达的酶蛋白AMY进行了纯化 ,并初步研究了它的酶学性质 ,它的作用最适pH 3 2 ,在pH 2 5~ 4 6范围内 ,酶活性保留 5 0 %以上 ,它的最适温度 6 5℃ ,在 70℃下处理 30min ,酶活性维持 5 0 %以上 ,基本保留了天然酶蛋白的耐热性和嗜酸性。位于基因amy内部 +1174~+32 88bp的基因片段amy′全长 2 115bp ,编码 70 5个氨基酸 ,在E .coli表达后依然具有淀粉酶的活性。
分类号: Q814
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