Mafb基因敲除小鼠的构建及其尿道下裂表型初步分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘振忞

作者： 刘振忞;孔晓燕;沈炼桔;龙春兰;刘星;魏光辉

作者机构：

关键词： v-maf肌筋膜纤维肉瘤癌基因同源物B;基因敲除;基因型鉴定;尿道下裂;动物模型

期刊名称： 海军军医大学学报

ISSN： 2097-1338

年卷期： 2022 年 02 期

页码： 152-159

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的 利用成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)及其相关蛋白9(Cas9)构建v-maf肌筋膜纤维肉瘤癌基因同源物B(Mafb)基因敲除小鼠，初步研究该基因缺失对尿道发育的影响。方法 根据CRISPR/Cas9技术原理构建Mafb基因敲除F0代C57BL/6J小鼠；经PCR及基因测序鉴定阳性的F0代小鼠与野生型C57BL/6J小鼠交配繁殖，获得F1 代Mafb基因敲除杂合子(Mafb~(+/-))小鼠；Mafb~(+/-)小鼠间进行交配繁殖，获得Mafb基因敲除纯合子(Mafb~(-/-))胎鼠。收集雄性Mafb~(-/-)胎鼠阴茎组织，通过免疫荧光技术检测阴茎组织中Mafb蛋白表达情况及尿道缝处上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达情况，扫描电子显微镜及石蜡切片H-E染色观察阴茎组织形态。结果 成功构建、繁育Mafb~(+/-)小鼠并得到雄性Mafb~(-/-)胎鼠。免疫荧光检测结果显示雄性Mafb~(-/-)胎鼠阴茎组织中几乎不存在Mafb蛋白表达，且相较于野生型小鼠其尿道缝处E-cadherin蛋白表达明显降低、α-SMA蛋白表达明显增高；扫描电子显微镜及H-E染色显示雄性Mafb~(-/-)胎鼠为尿道下裂表型。结论 成功构建Mafb基因敲除小鼠模型，该基因敲除可导致小鼠出现尿道下裂表型及尿道缝处细胞中E-cadherin和α-SMA的表达差异，为进一步研究该基因在尿道下裂发生机制中的作用奠定了基础。

分类号： R726.9

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