H7亚型禽流感病毒一步法RT-PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 包红梅

作者: 包红梅;王秀荣;陶启蒙;蔡东东;王馥梅;陈化兰

作者机构:

关键词: 禽流感病毒;反转录聚合酶链反应;H7N1;亚型鉴别

期刊名称: 生物工程学报

ISSN: 1000-3061

年卷期: 2009 年 27 卷 11 期

页码: 66-71

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 通过分析流感数据库45个H7亚型禽流感病毒的HA序列,在保守区内设计并合成引物,建立了一步法RT-PCR检测方法,扩增片段大小为501bp。通过对H7亚型禽流感病毒尿囊液和棉拭子浸出液不同滴度检测,证实病毒尿囊液最低检出量为105.5EID50/mL;阳性棉拭子最低检出量为103EID50/mL。用该方法检测H1~H15亚型禽流感病毒和鸡新城疫病毒等其他14种禽病病原进行检测,仅有H7亚型AIV有特异性目的条带,与其他均无交叉反应。从脏器及咽喉、泄殖腔棉拭子样品的病毒分离和RT-PCR方法比较,表明在10-1的样品浓度下,两者可以达到相同的检出量。表明该一步法RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高和准确率高的特点。

分类号: S852.65

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