猪巴氏杆菌和波氏杆菌双重PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 徐翔飞

作者: 徐翔飞;黄盼;崔雪梅;黄叶娥;季权安;韦强;李科;宋厚辉;鲍国连;刘燕

作者机构:

关键词: 猪;巴氏杆菌;波氏杆菌;双重PCR

期刊名称: 浙江农业科学

ISSN: 0528-9017

年卷期: 2023 年 010 期

页码: 2533-2539

摘要: 本文旨在建立一种针对猪巴氏杆菌和波氏杆菌的特异、高效的双重PCR检测方法并应用于临床样品检测。根据巴氏杆菌和波氏杆菌保守序列16S rRNA基因为靶基因,应用Primer 3.0 Plus软件设计了2对引物,在此基础上建立并优化双重PCR反应体系。结果显示,该双重PCR检测方法能有效扩增出猪巴氏杆菌和波氏杆菌的172和519 bp的特异性片段,PCR扩增产物测序结果为目标片段;对副猪嗜血杆菌、产气荚膜梭菌、大肠埃希菌、沙门氏菌、链球菌的扩增结果均为阴性。将该方法应用于临床样品检测,对63例呼吸道症状的病猪的鼻拭子和肺脏进行细菌分离,其中10份样品检测出巴氏杆菌,8份样品检测出波氏杆菌,2份为巴氏杆菌和波氏杆菌混合感染,与已报道的PCR检测方法符合率为100%。表明该研究建立的双重PCR体系可为临床猪巴氏杆菌、波氏杆菌及混合感染提供一种灵敏且高效的检测方法。

分类号: S852.61

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