布鲁氏菌核糖体L7/L12蛋白的原核表达及对鼠源树突状细胞的作用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张广林

作者： 张广林;徐龙;高云艳;李玲霞;尚佑军;张勇;曹小安;赵兴绪

作者机构：

关键词： 布鲁氏菌;树突状细胞;免疫细胞活化

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2022 年 34 卷 003 期

页码： 489-497

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究和探讨布鲁氏菌核糖体L7/L12蛋白对鼠源树突状细胞(BM-DCs)分化和成熟的影响,用布鲁氏菌S2疫苗株为模板扩增L7/L12基因,构建重组质粒pET30a-L7/L12,用大肠埃希菌原核表达系统进行诱导表达,并用Ni柱对表达的蛋白进行纯化.用IL-4和GM-CSF诱导培养鼠源DCs,用脂多糖(LPS)和L7/L12蛋白刺激DCs后检测其表面共刺激分子和炎症因子的变化.结果表明,重组蛋白在1 mmol·L-1的IPTG、16℃过夜的条件下以可溶性形式高效表达,其大小为18 ku,纯度达到93%以上并有一定的反应原性.流式细胞仪检测被刺激的BM-DCs细胞表面CD40、CD80等抗原分子的表达显著(P<0.05)高于空白对照组.qPCR结果显示,炎性细胞因子TNF-β、IL-1β、IL-12极显著(P<0.01)高于空白对照组.重组L7/L12蛋白具有刺激DCs细胞分化、成熟和促进炎症因子释放的功能.

分类号： S852

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