甜瓜响应甜瓜坏死斑点病毒侵染的cDNA文库构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吴会杰

作者： 吴会杰;康保珊;彭斌;刘丽锋;古勤生

作者机构：

关键词： 甜瓜;甜瓜坏死斑点病毒;cDNA文库;文库质量评价

期刊名称： 中国蔬菜

ISSN： 1000-6346

年卷期： 2020 年 009 期

页码： 36-40

收录情况： 北大核心

摘要： 为解析甜瓜坏死斑点病毒(melon necrotic spot virus,MNSV)与寄主甜瓜的互作,筛选病毒编码的蛋白与寄主的互作因子,构建了MNSV侵染的甜瓜cDNA文库.在甜瓜品种白玫子叶期接种MNSV,待植株表现典型的系统坏死斑点症状后,收集症状明显的整株甜瓜幼苗,采用SMART(switching mechanism at 5′end of RNA transcript)技术合成cDNA,利用DSN(duplex-specific nuclease)对cDNA均一化处理后,首次构建了MNSV侵染甜瓜的cDNA文库并评价了文库的质量,文库容量为4.5×106 cfu,文库滴度为3.6×107 cfu·mL-1,文库克隆重组率为100%,文库插入片段大小在500~2000 bp之间,说明文库质量很好.该文库的构建为解析MNSV与寄主互作及甜瓜响应MNSV的致病机制奠定了基础.

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