牛凝乳酶全长cDNA的克隆及其原核表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张莉

作者： 张莉;姜媛媛;张健;杨贞耐

作者机构：

关键词： 凝乳酶;克隆;原核表达载体;构建

期刊名称： 食品与生物技术学报

ISSN： 1673-1689

年卷期： 2010 年 29 卷 02 期

页码： 271-275

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从小牛皱胃中提取凝乳酶(Chymosin)总RNA,经过RT-PCR获得凝乳酶cDNA,纯化后与pMD-18T载体连接,转化大肠杆菌JM109,通过双酶切和序列测定,获得了凝乳酶全长基因序列。序列测定表明,凝乳酶全长核苷酸长度为1 143 bp,编码381个氨基酸。与GenBank上已发表序列NM_180994进行比较,核苷酸同源性为99.56%。将该基因片段克隆到原核表达载体pET-22b中,构建重组质粒pET-22b/Chymosin,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确,为凝乳酶的进一步表达奠定了基础。

分类号： Q785

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