小峰熊蜂蜂毒磷脂酶A2基因的克隆及表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高丽娇

作者： 高丽娇;黄家兴;吴杰

作者机构：

关键词： 小峰熊蜂;磷脂酶;基因克隆;序列分析;基因表达

期刊名称： 昆虫学报

ISSN： 0454-6296

年卷期： 2013 年 56 卷 09 期

页码： 974-981

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)是蜂毒主要成分,也是蜂毒的主要过敏原,在熊蜂个体和群体防御方面具有重要功能。为了探究熊蜂A2基因的生物学功能,本研究以小峰熊蜂Bombus hypocrita为材料进行了蜂毒PLA2基因的克隆、鉴定了与表达特性分析。结果表明:该基因全长为2 272 bp,GenBank登录号为KF214771,由4个外显子和3个内含子组成,编码区(CDS)长为543 bp,共编码180个氨基酸残基。氨基酸序列相似分析显示,成熟的小峰熊蜂PLA2(含有136个氨基酸)与其他蜂类PLA2的氨基酸序列相似性较高,均包含10个保守的半胱氨酸残基、1个保守的Ca~(2+)结合位点和1个酶活性中心。基于PLA2氨基酸序列的系统进化树分析表明,熊蜂属Bombus与蜜蜂属Apis在不同分支上,属单系群,且蜜蜂属分化较早。荧光定量PCR结果表明,PLA2基因在小峰熊蜂各日龄均有表达,且随日龄增长,表达量呈先上升后下降的趋势,10日龄时出现峰值,其表达量显著高于其他日龄(P<0.05)。半定量PCR结果表明,PLA2基因在毒腺、卵巢、中肠中表达量较高,在足、触角、食道腺中表达量较低,在脂肪体、肌肉、神经、气管、复眼、脑中未表达。本研究探明了小峰熊蜂PLA2的基因结构及其表达特性,丰富了熊蜂PLA2的生物学基础,为进一步深入研究熊蜂PLA2生物学功能和作用机制以及开发蜂毒生物制剂等鉴定了基础。

分类号： S896.5

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