pPIC9K-IL-2重组质粒的构建及其在毕赤酵母中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘斌

作者： 刘斌;祁光宇;陈晓宇;王宇;牟克斌;黄银君;刘学荣

作者机构：

关键词： 绵羊;白介素-2基因;毕氏酵母;基因表达;SDS-PAGE

期刊名称： 甘肃农业大学学报

ISSN： 1003-4315

年卷期： 2014 年 03 期

页码： 32-36

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据Ovis aries interleukin(IL-2)序列设计1对引物,用PCR法扩增的目的基因进行克隆,将测序正确的IL-2基因片段和表达载体pPIC9K同时双酶切后相连,构建pPIC9K-IL-2重组表达载体.将线性化的载体pPIC9K-IL-2电转化毕赤酵母GS115,对重组酵母转化子经MD平板筛选和PCR分析鉴定后,用G418(4g/L)筛选到多拷贝菌株,进行不同条件下甲醇诱导表达.结果表明:经PCR鉴定IL-2基因已整合到酵母基因组中,表达产物经SDS-PAGE电泳分析发现相对分子质量约为18ku目的蛋白表达条带,本研究成功构建了高效表达重组羊IL-2毕赤酵母菌株,为新型细胞因子佐剂的研发奠定了基础.

分类号： S826

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