脂质体介导pAcGFP-bFADD重组质粒转染Hela细胞条件的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杨润军

作者： 杨润军;李武峰;张路培;许尚忠;李俊雅;高雪;陈金宝

作者机构：

关键词： 转染;lipofectamine2000;重组质粒;Hela细胞

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2009 年 17 卷 05 期

页码： 46-51

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用脂质体lipofectamine 2000介导携带有AcGFP报告基因的pAcGFP-bFADD质粒转染Hela细胞,并通过调整质粒DNA、脂质体的浓度及转染时间来优化转染条件,转染后12h在荧光显微镜下计数阳性细胞,MTT法检测各转染条件下Hela细胞的活性。结果表明,将2.4μg的pAcGFP-bFADD质粒与3.0μL lipofectamine 2000制备转染复合物与Hela细胞作用6h可以获得62.3%的转染效率,并且保持较高的细胞存活率(83%)。当质粒DNA与脂质体的量增加至3.2μg和6.0μL时,转染复合物对细胞的毒性作用明显增强,对细胞的抑制率可达42.98%,与对照组相比,差异极显著(P<0.01);条件优化后AcGFP-bFADD融合基因于转染后72h达到表达高峰,绿色荧光阳性细胞所占比率达到64%。

分类号： Q78

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