阪崎克罗诺杆菌RPA-LF检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张欣

作者： 张欣;王权;祁克宗;宋祥军;韩先干;蒋蔚

作者机构：

关键词： 阪崎克罗诺杆菌;重组酶聚合酶扩增技术;侧流层析;快速检测

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2022 年 52 卷 002 期

页码： 168-176

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以阪崎克罗诺杆菌特异性基因16SrRNA和外膜蛋白基因ompA为靶序列,设计适用于重组酶聚合酶扩增-侧流层析技术(RPA-LF)的引物和探针,并优化反应条件.结果表明,RPA反应可在25~45℃进行,10~20 min即可完成.优化条件后,RPA-LF总反应时间仅为20 min,包括RPA在39℃反应15 min,RPA反应产物在LF试纸条上反应5 min,即可用肉眼判断结果.该方法具有较高的灵敏度,最低检测限可以达到80 pg/反应,约为960 CFU/反应.与7种常见的食源性病原菌都没有交叉反应,表明该方法具有较好的特异性.此外,该方法能够同时识别6种阪崎克罗诺杆菌同属菌,表明该方法广谱性好.本研究中建立的针对阪崎克罗诺杆菌的RPA-LF检测方法,具有操作简便、快速敏感的优点,为该菌的现场快速检测打下了基础.

分类号： S852.6

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