猪链球菌乳酸脱氢酶基因的原核表达及重组蛋白的反应原性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高明明

作者： 高明明;王淑杰;王俊;金家民;张璐;刘永刚;李爱东;陶冶;李莉

作者机构：

关键词： 猪链球菌;乳酸脱氢酶;反应原性;原核表达

期刊名称： 石河子大学学报(自然科学版)

ISSN： 1007-7383

年卷期： 2015 年 33 卷 02 期

页码： 188-191

摘要： 为了验证双向电泳筛选出的7型猪链球菌WH分离株免疫相关蛋白乳酸脱氢酶的反应原性,本实验采用克隆表达的方法对其进行研究。根据质谱鉴定的NCBI登录号查找乳酸脱氢酶基因序列,并设计特异性引物,对乳酸脱氢酶基因进行扩增,克隆入p ET30a载体,构建重组质粒p ET30a-LDH,测序后转化入大肠埃希氏菌中。用IPTG进行诱导重组菌,SDS-PAGE和Western blot分析表达产物。SDS-PAGE分析结果显示表达的重组融合蛋白相对分子量为41ku;Western blot分析结果显示该重组蛋白可与7型猪链球菌WH分离株多克隆抗体发生特异性血清学反应。这表明表达的重组LDH蛋白具有良好的反应原性,为预防和控制猪链球菌病提供有效的疫苗候选分子奠定基础。

分类号： S852.611

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