猪肺炎支原体通过抑制SPLUNC1功能破坏呼吸道炎性反应平衡

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王海燕

作者： 王海燕;张珍珍;倪博;刘蓓蓓;冯志新

作者机构：

关键词： 猪肺炎支原体;支原体-宿主相互作用;炎性反应;SPLUNC1

期刊名称： 中国农业科学

ISSN：

年卷期： 2024 年 001 期

页码： 216-226

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【背景】猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp）通过定植猪呼吸道黏膜层，破坏呼吸道炎性反应平衡，引起炎性损伤和持续性感染。短的上腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白（short palate lung and nasal epithelial clone1,SPLUNC1）是呼吸道黏膜分泌的具有重要抗菌和抗炎功能的蛋白，被认为是呼吸道黏膜面对危险信号时的“信号传感器”。【目的】从Mhp和SPLUNC1相互作用入手，分析Mhp感染对SPLUNC1表达的影响以及SPLUNC1对Mhp引起的炎性反应的调控作用，揭示Mhp引起炎性损伤的新机制，为解决Mhp持续性感染问题提供参考。【方法】利用猪肺炎支原体对猪支气管上皮细胞（porcine bronchial epithelial cells,PBECs）感染模型和猪体感染模型，通过荧光定量PCR、间接免疫荧光和Western-blotting等方法，分别检测Mhp感染后对肺脏中SPLUNC1以及体外PBECs中SPLUNC1转录和表达的影响。克隆并扩增猪源SPLUNC1基因通过酶切鉴定，构建成功SPLUNC1真核和原核表达重组质粒pCDNA3.1-SPLUNC1以及pET28a-SPLUNC1。与此同时，设计靶向SPLUNC1的siRNA干扰片段。利用体外SPLUNC1蛋白孵育、体内呼吸道黏膜SPLUNC1抗体封闭，通过Mhp CCU50检测明确SPLUNC1对Mhp体内外生长的影响。在猪支气管上皮细胞中，通过过表达或siRNA干扰SPLUNC1基因，后感染Mhp，利用Western-blotting、间接免疫荧光以及酶联免疫吸附方法，明确SPLUNC1对Mhp的黏附作用、诱导炎性因子表达以及MAPK信号通路活化的影响。【结果】Mhp感染猪后可引起肺脏实变，主要组织病理表现为肺脏炎性损伤，同时显著上调肺泡灌洗液中趋化因子CXCL8和炎性因子TNFα和IL-1β分泌。Mhp体内外感染后，体内肺脏和体外猪支气管上皮细胞中SPLUNC1的转录和表达均显著下调。以上研究表明，Mhp可诱导肺脏炎性反应，抑制SPLUNC1表达。另一方面，体外PBECs中过表达SPLUNC1后，Mhp感染引起的CXCL8表达显著减少；siRNA干扰SPLUNC1后，Mhp感染引起的CXCL8表达显著增加，表明SPLUNC1负调控Mhp感染引起的CXCL8表达。基于Mhp感染入侵呼吸道过程，本研究进一步解析SPLUNC1负调控CXCL8表达的机制。结果表明：无论是SPLUNC1和Mhp体外孵育，还是SPLUNC1抗体体内封闭，Mhp的体内外生长均未受影响；SPLUNC1的过表达或siRNA干扰对Mhp体外黏附PBECs的能力也无显著影响；过表达SPLUNC1可抑制pERK和IκBα的激活，相反SPLUNC1 siRNA干扰后，可促进pERK和IκBα的激活。以上研究证明SPLUNC1不是通过调控Mhp的生长和黏附，而是通过负调控MAPK-ERK通路的活化来调控CXCL8的表达。【结论】SPLUNC1可通过MAPK-ERK信号通路来调控炎性因子的过度表达，维护宿主炎性平衡；与此同时，Mhp感染后可通过抑制SPLUNC1的表达来破坏宿主炎性反应的平衡调控，进而引起炎性损伤。本研究为解析Mhp感染损伤机制提供依据。

分类号： S858.28

  • 相关文献

[1]围产后期亚临床酮病对奶牛氧化应激、免疫功能和生产性能的影响. 宝华,宋利文,张航,杨阿日木扎,谢天明,马燕芬. 2019

[2]羟基红花黄色素A对LPS诱导的羊子宫内膜上皮细胞炎性反应的抑制作用. 段景龙,宣超莹,刘茂军,马玉忠. 2021

[3]儿童系统性红斑狼疮合并心脏损害研究进展. 刘怡,吴晓云. 2020

[4]NF-κB免疫生物学作用的研究进展. 孙静静,邵军军,常惠芸. 2011

[5]壳聚糖抗无乳链球菌引起的奶牛乳腺上皮细胞炎性反应. 孙铭维,童津津,蒋林树,熊本海,毛胜勇. 2020

[6]应用大蒜素缓解牛子宫内膜炎损伤的研究. 楚秋霞,陈付英,冯亚杰,张子敬,师志海,施巧婷,王二耀,吕世杰,付晓鹤. 2025

[7]猪支原体肺炎PCR诊断试剂盒的研制. 杨莉,余波,史开志,杨茂生,吴位珩. 2013

[8]贵州猪气喘病的流行病学调查. 杨莉,杨茂生,杨胜坤,刘运平,史开志,魏赐开,刘兵,刘保群,袁明娅,吴位珩. 2016

[9]不同因素对猪肺炎支原体颜色变化单位测定的影响. 韦艳娜. 2013

[10]猪肺炎支原体MY-99株的致病性. 熊焰,石谦,邓均华,苟琳. 2006

[11]猪肺炎支原体P97 TaqMan-BHQ荧光定量PCR检测方法的建立及应用. 武昱孜,靳蒙蒙,白方方,张旭,华利忠,雷治海,邵国青. 2012

[12]猪支原体肺炎防治技木. 丁卫星,王荣谈,王晶晶. 2013

[13]基于高通量测序分析肺炎支原体感染姜曲海猪肺组织miRNA表达谱. 倪黎纲,赵旭庭,王宵燕,宋成义,吴信生,甘源. 2019

[14]猪肺炎支原体主要保护性抗原的研究进展. 王文秀,王宝琴,徐晴晴,刘博,张艳. 2018

[15]猪肺炎支原体脂蛋白LppT的多克隆抗体制备及鉴定. 刘威,袁芳艳,周丹娜,刘泽文,杨克礼,段正赢,郭锐,蔡行,肖少波,田永祥. 2017

[16]苏淮猪和外来品种猪肺炎支原体血清抗体变化规律研究. 毛爱民,华利忠,冯志新,范锋,邹建波,姚黄江,缪剑岭,胡明英. 2019

[17]猪肺炎支原体PCR快速检测方法的应用研究. 柳丽,张磊,刘蓓蓓,甘源,韦艳娜,冯志新,熊祺琰,刘茂军,邵国青. 2017

[18]不同猪支原体肺炎活疫苗菌株P46和P97基因序列差异性分析. 武昱孜,邢宪平,韦艳娜,熊祺琰,冯志新,邵国青. 2017

[19]猪肺炎支原体培养技术研究. 还红华,邵国青,倪艳秀,王继春,何家惠. 2001

[20]猪肺炎支原体醛缩酶原核表达及致猪气管上皮细胞凋亡的研究. 华利忠,王世杰,马丹夫,刘茂军,冯志新,刘蓓蓓,韦艳娜,于岩飞,邵国青. 2019

作者其他论文 更多>>

微信小程序