高效双价(Bt+cpti)表达载体的构建及其表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 薛计雄

作者： 薛计雄;张锐;张桦;孙国清;孟志刚;周焘;郭三堆

作者机构：

关键词： 双价载体;高效;抗虫性;表达分析

期刊名称： 中国农业科技导报

ISSN： 1008-0864

年卷期： 2013 年 03 期

页码： 91-97

收录情况： CSCD

摘要： 以已有的中间载体和表达载体为基础,对Bt、cpti基因进行了修饰。在cpti基因的5'端增加了大豆胰蛋白酶抑制剂SKTI信号肽序列,在3'端增加了内质网滞留信号肽KDEL序列,然后在Bt基因的5'端增加了叶绿体靶向肽序列,构建了带有信号肽的双价表达载体PGBIC(K).B.4A和不含信号肽的对照载体PGBIC.B.4A。通过农杆菌介导的喷花法转化陆地棉Y18,Southern杂交结果显示,外源基因已经整合到了受体植物基因组中;ELISA结果显示,所获得的5株阳性株蛋白表达量分别提高了1～8倍不等。在杀虫实验中,修饰的双价载体的转基因植株1/4-1由于蛋白表达量的积累而显示了较高的棉铃虫抗性。为获得更高抗性的双价转基因抗虫棉提供了一种新的方法,并为基因工程中提高外源蛋白积累量的研究。

分类号： S435.622

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